細(xì)胞培養(yǎng)中,很容易發(fā)生支原體污染,而常見的青鏈霉素等大多數(shù)的抗生素對(duì)支原體又無效。因此選對(duì)一款有效且無需長(zhǎng)期使用的支原體祛除劑,對(duì)于挽救污染細(xì)胞可以起到?jīng)Q定性作用。
以往發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細(xì)胞中存在支原體污染時(shí),應(yīng)立即終止實(shí)驗(yàn),全部丟掉被污染的細(xì)胞,以避免支原體污染的擴(kuò)散。而對(duì)于費(fèi)力擴(kuò)增的細(xì)胞(如已轉(zhuǎn)染,或經(jīng)過體外刺激),如果細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有支原體污染,但此細(xì)胞又不愿丟棄,希望繼續(xù)培養(yǎng),又怎么辦呢?
這里向您推薦祛除細(xì)胞支原體污染的一種方法,其中要用到德國(guó)MB公司生產(chǎn)的專li復(fù)合抗生素Zell Shield®。
Zell Shield®特點(diǎn)
1) 高效廣譜
Zell Shield®通過同時(shí)阻止支原體、霉菌、酵母、細(xì)菌增殖過程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。
2) 安全
無細(xì)胞毒性,專li復(fù)合支原體敏感抗生素,對(duì)大多數(shù)細(xì)胞株無毒。
3) 活性穩(wěn)定
在細(xì)胞培養(yǎng)期間,Zell Shield®始終保持穩(wěn)定的活性。
4) 使用方便
Zell Shield®為無菌溶液,可直接加入培養(yǎng)基使用。
二、懸浮沖洗法 + Zell Shield®祛除支原體污染
據(jù)研究表明,約98%的支原體存在于細(xì)胞表面和細(xì)胞間隙。支原體直徑約180~350nm,比細(xì)胞小很多,經(jīng)低速離心可與細(xì)胞分離。通過反復(fù)懸浮沖洗細(xì)胞、離心,加上使用Zell Shield®,即可在細(xì)胞培養(yǎng)四代以內(nèi)有效地祛除支原體。
具體流程如下圖:
要點(diǎn)歸納:
1. 每次傳代時(shí),重復(fù)三次對(duì)細(xì)胞懸浮沖洗步驟非常重要,操作要正確、規(guī)范,以達(dá)jia效果!
2. 在培養(yǎng)基中加入1%Zell Shield®,抑制支原體增殖!
3. 使用安全的血清、培養(yǎng)基等試劑,不再有新的支原體加入!
只要如法操作,即傳代時(shí)懸浮沖洗,并且用含Zell Shield®的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞四代后,細(xì)胞中的支原體即可祛除。希望以上方法能給你帶來幫助。